PROJETO RESUMO:
Hipertensão Arterial Pulmonar (HAP) e hipertensão pulmonar venosa (PVH) são duas formas altamente mórbida da hipertensão pulmonar que atualmente só podem ser diferenciadas por cateterismo cardíaco, um procedimento altamente invasivo e caro. Distinguir PAH de PVH é fundamental que cada estado tem modalidades de tratamento diferentes para otimizar resultados.
Produtos finais da glicação avançada (AGEs) são um biomarcador excelente candidato para tal um ensaio. AGEs são uma classe de moléculas formadas por uma reação não enzimática entre carboidratos e grupos amino de proteínas e lipídios. Acúmulo de AGE em tecidos diminui a distensibilidade e conformidade e foi mostrado para desempenhar um papel na patogênese da aterosclerose diabética e doença renal. Em um estudo preliminar que temos mostrado que os níveis séricos de AGEs total em pacientes PVH foram significativamente superiores aos níveis encontrados em pacientes com HAP, levando a crer que a medição de AGEs pode ser um exame não invasivo capaz de distinguir PAH de PVH.Infelizmente, há pouca disponibilidade de kits disponíveis comercialmente ELISA para a medição de AGEs total, e nossa experiência com esses recursos revela importantes limitações que impedem a sua aplicação na pesquisa alta taxa de transferência de translação. A descoberta de Mesoescala usa uma plataforma inovadora que permite o desenvolvimento de ensaios individuais e multiplex de soro baseado biomarcadores tais como AGEs. A tecnologia usa uma microplaca eletrodo de carbono contendo matrizes padronizadas e sulfo Tag-etiquetas para detecção de anticorpos que emitem luz com a estimulação eletroquímica na superfície do eletrodo.
Nosso objetivo atual é usar a plataforma de descoberta de Mesoescala a 1) desenvolvimento de imunoensaios singleplex para a detecção de AGEs e produtos total de AGE e 2) converter esses ensaios singleplex para um formato multiplex para a medição simultânea de AGEs total e produtos AGE individuais a partir de uma única amostra. Longo prazo, esperamos usar estes ensaios multiplex para analisar o perfil de AGEs em uma coorte maior de pacientes com HAP e PVH, correlacionando estes perfis com parâmetros clínicos e hemodinâmicos. Desenvolvimento desta tecnologia vai facilitar a investigação translacional de AGEs em populações de pacientes múltiplos além de hipertensão pulmonar. Em última análise, a capacidade de produção elevada da plataforma de Mesoescala permitirá a aplicação em ambientes clínicos. Portanto, este Prêmio de Desenvolvimento dos métodos irão pavimentar o caminho para um maior conhecimento sobre o diagnóstico e patofisiológico da doença vascular pulmonar, com potencial para identificar novos alvos terapêuticos e os resultados dos pacientes melhorou.
